افر یک محلول مبتنی بر حلال آب است و از یک اسید ضعیف و باز مزدوج آن یا باز ضعیف و اسید مزدوجش تشکیل شده است. محلول های بافر در برابر تغییر PH ناشی از اضافه شدن کمی اسید یا باز و تغییر غلظت محلول مقاومت می کنند و اسیدیته محلول را در محدوده مشخصی ثابت نگه می دارند.حتی اسید و باز های قوی نیز تأثیر بسیار ناچیزی بر PH محلول های بافری می گذارند و همین قابلیت مهم و ارزشمند باعث شده تا این محلول ها در زمینه های مختلفی چون تهیه نگهدارنده های غذایی، مواد شوینده، فرآورده های آرایشی و بهداشتی، چرم، رنگ و… کاربرد های زیادی داشته باشند. از جمله رایج ترین بافر های مورد استفاده در دنیای زیست شناسی می توان به تیایپیاس، بیسین، Tris، Tricine، تپسو و… اشاره نمود.
برای خرید بافر با کیفیت بالا و با ضمانت اصالت ماده باید به این نکته توجه داشته باشید که از شرکت های با تجربه فروش مواد شیمیایی ماده مورد نظر خود را تهیه کنید. مراکزی که مواد را از برندهای معتبر تهیه میکنند و در شرایط استاندارد با رعایت کلیه شرایط حمل و نگهداری به مشتریان خود ارائه میدهند. یکی از این تامین کنندگان و فروشندگان بزرگ در ایران شرکت دایا اکسیر است که به عنوان نمایندگی رسمی برندهای بزرگ و شناخته شده در زمینه تامین ماده شیمیایی از جمله سیگما آلدریچ و مرک فعالیت میکند شرکت دایا اکسیرعلاوه بر اینکه بهترین و با کیفیت ترین محصولات شیمیایی را تامین نموده و به فروش میرساند، بهترین خدمات پشتیبانی و مشاورهای را توسط کارشناسان و بازرگانان به شما مشتریان محترم ارائه مینماید تا در جریان آخرین تحولات و اطلاعات به روز در صنعت کسب و کار خود باشید و جدیدترین مواد شیمیایی مورد نیاز خود را با سرعت بیشتری نسبت به رقبای خود بدست آورید.
اصطلاح پایه tris برای نامگذاری ترکیب تریس (هیدروکسی متیل) آمینومتان با داشتن فرمول شیمیایی C₄H₁₁NO₃ استفاده می شود. همچنین به عنوان THAM شناخته می شود. این یک ترکیب آلی است که به عنوان یک جزء در محلول های بافر TAE و TBE بافر مورد استفاده قرار می گیرد. این ترکیب حاوی یک گروه آمین اولیه است.
بنابراین می تواند واکنشی را متحمل شود که یک آمین اولیه معمولی تحت آن باشد. به عنوان مثال: واکنشهای تراکم با آلدهیدها. خواص اساسی این ترکیب به دلیل همین گروه آمین بوجود می آید. جرم مولی این ترکیب برابر با 121.14 گرم در مول است. این یک پودر کریستالی سفید در دمای اتاق و فشار است. نقطه ذوب این ترکیب حدود 176 درجه سانتی گراد و نقطه جوش 219 درجه سانتی گراد است.
دامنه pH مؤثر این ترکیب بین 7.5 تا 9.0 است. این بدان دلیل است که pKa اسید کونژوگه این ترکیب در دمای 25 درجه سانتیگراد 8.07 است. این بافر می تواند با تغییرpH، آنزیم های خاصی را مهار کند. این ترکیب توسط چگالش نیترومتان با فرمالدئید در شرایط اساسی به صورت صنعتی تهیه می شود.
تریس بیس (پایه تریس) و تریس هیدروکلراید مؤثر در محلول های مختلف بافر هستند. تفاوت کلیدی بین پایه تریس و تری هیدروکلراید در این است که پایه تریس حاوی فرمول شیمیایی C₄H₁₁NO₃ است در حالی که تریس هیدروکلراید حاوی همان فرمول شیمیایی با یک مولکول اضافی هیدروکلراید است.
پاسخ سریع این است که Tris base باز یک بافر بازی است، در حالی که Tris HCl بافر اسیدی است. به خاطر داشته باشید که بافرها برای مقاومت در برابر تغییرات pH استفاده می شوند. حتی غلظت های کوچک اسید یا باز قوی، بدون بافر، می تواند به طور قابل توجهی pH محیط را تغییر دهد. بنابراین، دلیل انتخاب بین tris HCl یا tris base ممکن است به آنچه قصد دارید با بافری که میسازید به دست آورید نیز بستگی دارد.
تریس (تریس باز) یک ترکیب آلی است که عمدتاً در زیست شناسی مولکولی برای ساخت محلول های بافر یا عمل به عنوان بافر پایه استفاده می شود. دستور العمل های بافر رایج با استفاده از tris عبارتند از:
1. بافر استخراج DNA CTAB
2. بافر TAE
3. بافر TBE
4. بافر TE
5. محلول استوک بافر تریس
6. بافر تریس گلیسین
به غیر از دستور العمل های رایج، محققان از tris برای بافر تغییرات pH در محلول یا به عنوان بافر در پروتکل های تخصصی تر استفاده می کنند.
تریس HCLیک عامل بافر (بافر اسیدی) است که معمولاً توسط زیست شناسان مولکولی برای تنظیم pH محلول یا تثبیت pH استفاده می شود . Tris HCl که به صورت تجاری در دسترس است، Tris با HCl اضافه شده است. می توان آن را در دستور العمل های بافر رایج مانند:
1. بافر استخراج DNA CTAB
2. بافر Leammli برای SDS-PAGE
3. بافر TAE
4. بافر TBE
5. بافر TE
6. محلول بافر تریس HCl
تعیین اینکه آیا از tris HCl یا tris base برای این دستور العمل های رایج استفاده می شود بستگی به پروتکلی دارد که با آن کار می کنید. هنگامی که نیاز به تنظیم pH محلول خود دارید، می توانید از ترکیب اسیدی یا بازی مزدوج استفاده کنید.
هیچ تفاوتی بین tris Base و tris HCl وجود ندارد. آنها یکسان هستند. دستور العمل های Tris Base و Tris HCl هر دو به یک چیز نیاز دارند:
حل کردن تریس در آب و تنظیم pH .
هنگام کار با tris در تنظیم pH احتیاط کنید. اگر دمای کاری شما تغییر کند، pH تریس تغییر می کند.
برای جلوگیری از نوسانات pH ،pH خود را در همان دمایی که کار خود را انجام می دهید تنظیم کنید.
1. احتمال افزایش بیش از حد pH را کاهش می دهد.
2. از نیاز به استفاده از اسید قوی برای تنظیم pH جلوگیری می کند.
3. به حفظ تکرارپذیری کمک می کند.
همانطور که از تریس HCl برای کاهش pH استفاده می کنید، مزایای استفاده از تریس بیس برای افزایش pH به جای NaOH یا KOH یکسان است.
هر دو ماده در محلول های بافر TAE و TBE هستند. هر دو ترکیبات آلی هستند.
1. بهعنوان یک جز از بافر H بافر تفکیک سلولی
2. معمولاً بهعنوان یک جزء بافر برای استخراج فنلی DNA یا RNA
3. برای شستشو و اشباع چاهکها در روش ELISA ساندویچ
4. بهعنوان یک بافر جهت حل نمودن نمونههای پروتئین استخراجشده و خشکشده
5. برای تهیه بافر Tris-HCl که برای پایدار نمودن پروتئینها استفاده میشود
6. بهعنوان یک بافر برای استخراج کاروتنوئیدها
7. بهعنوان یک جز از بافر نمونه یا سمپل بافر در حین استخراج پروتئین قبل از وسترن بلات
8. بهعنوان یک جز بافر نمونه برای الکتروفورز ژل پلی آکریل آمید دودسیل سدیم سولفات (SDS-PAGE)
9. آمادهسازی محلول شبیه سازی شده بدن (Simulated body fluid) یا SBF برای آزمایش جذب فسفات کلسیم (CaP)
نکته مهم در ساخت محلول های تریس
هنگام تهیه محلولهای تریس بیس در pH و درجه حرارت معین، لازم است مخلوط مناسب از تریس بیس و نمک تریس بیس مربوطه انتخاب شود تا pH نهایی مورد نظر در دمای مورد نظر حاصل شود. تریس بیس دارای ضریب دمای قابلتوجهی است که بر pH محلول تأثیر میگذارد.