_واکنش زنجیره ای پلی مراز( Plymerase Chain Reaction)که مخفف آن PCRاست،برای تکثیرمنفرد یانسخه های کمی ازیک قطعه DNA باتوالی خاص،به تعداد هزاران یامیلیون ها نسخه است.روش بسیار ساده ای است بوده وبااستفاده از تغییرات حرارت ،میتوان چندین فرآیندرا بدنبال هم انجام داد.ازاین تکنیک،بعنوان روش قدرتمند تشخیص بالینی،برای وجود موتاسیون ها درژنوم انسانی ،بکار می رود.
_این روش بدلیل آنکه نیازمند زمان کمی برای تکثیر توالی خاصی است،حدودا ازسال۱۹۸۰جایگزین روش های قدیمی شیمیایی(که زمان طولانی تری برای تکثیرتوالی نیازداشتند)شد.
_درسال۱۹۸۳,KaryB.Mullis،طی انجام آزمایشاتی ،به نظریه PCRدست یافت.
_انواعPCR:
ا.RT-PCR : الگوی اولیه آنRNAتک رشته ای است.
اا.Nested-PCR : دراین روش،به منظور افزایش حساسیت PCR،از دوجفت پرایمر استفاده می شود.
ااا.Multiplex-PCR : دراین روش ازچند جفت پرایمر اختصاصی،برای هدف های مختلف استفاده می شود.
اااا.ARMS-PCR : برای تشخیص موتاسیون های نقطه ای بکار می رود وازدوجفت پرایمر استفاده می شود.
_کرونا ویروس ها خانواده بزرگی از ویروس ها و زیر مجموعه کرونا ویریده هستند که از ویروس سرما خوردگی معمولی تاعامل شدیدتری همانندسارس،مرس وکوید۱۹را شامل می شوند.
کروناویروس دردهه ۱۹۶۰کشف شد.
_ساختارآن دارای یک ژنوم RNA معمولی است.اگرچه کرونا ویروس ها بیشتر در حیوانات دیده می شوند،اما هفت نوع ازآنها،دستگاه تنفسی بدن انسان راتحت تاثیر قرار می دهند.تشخیص اینکه علت بیماری،کروناویروس باشدیانه،کمی مشکل است چراکه درمحیط آزمایشگاه،به سختی رشدونمو می کند.
ساختارآن ازدولایه تشکیل شده است ،هسته این ویروس راموادژنتیکی ولایه بیرونی آن را تاج های پروتئینی تشکیل می دهند .
بعدازورود به میزبان،ذره ی ویروسی بدون پوشش بوده و ژنوم آن وارد سیتوپلاسم سلول می شود .
_استانداردطلایی درتشخیصCOVID-19، تکنیکRT-PCRاست که الگوی اولیه آن برای تکثیر،RNAاست.اما مهم ترین مشکل این روش،حساسیت ۳۰تا۷۰درصدی آن است،یعنی ممکن است ازهر۱۰نفری که PCRبرای آنها انجام می گیرد،۳تا۷نفر دارای نتیجه ی تست منفی بوده و ویروس دراین افراد تشخیص داده نشود.
این عدم تشخیص می تواند ناشی از تعداد کم ویروس یا ورودتازه ویروس به بدن فردموردآزمایش ویاحتی استفاده نادرست از کیت های آزمایشی بوده باشد .
_ترکیب تست RT-PCR انجام شده از نمونه حلق،باCT-Chest اختصاصیت بیشتری درغربالگری بیماران آلوده بهCOVID-19دارد.هم چنین تست حلقیِRT-PCR،نسبت به دیگر نمونه های تشخیصیRT-PCR،ارجحیت دارد و درغربالگری افراد باآلودگی متوسط،انتخاب خوبی است،اما باتوجه به حساسیت کمی که در تشخیص دارد،برای تشخیص قطعی به کار نمی رود.
