ویرگول
ورودثبت نام
یادداشت های آزمایشگاه مولکولی
یادداشت های آزمایشگاه مولکولی
خواندن ۱ دقیقه·۱ سال پیش

آیا قاعده یک دهم حجم در مورد فست دایجست ها هم صدق می کند؟

جواب کوتاه بله است.

به ازای هر میکروگرم از DNA یک میکرولیتر آنزیم استفاده می شود و مثلا برای 5 میکروگرم،مقدار 5 میکرولیتر آنزیم و حجم نهائی واکنش باید 50 میکرولیتر باشد. مزیت اصلی آن سرعت انجام واکنش در حداکثر 15 دقیقه است. پس برای عدم برش پلاسمیدهایی که می خواستیم خطی کنیم و نشد می توانیم حجم واکنش را زیاد کنیم و بر اساس حجم نهائی کمی آنزیم اضافی بزنیم.

تمام این دردسرها برای این است که نمی توان به داده های نانودراپ تکیه کرد. فکر می کردم فقط در ایران اینطوری است که هیچ وقت دستگاه اسپکت درستی نداشتیم ولی اینحا هم با اینکه دستگاه نو کالیبره است ولی داده های دستگاه با چیزی که روی ژل می بینم همخوانی ندارد و عملا باید به صورت تجربی کار را ستاپ کنیم.

https://assets.thermofisher.com/TFS-Assets/BID/Reference-Materials/fastdigest-restriction-enzymes-labaid.pdf
https://assets.thermofisher.com/TFS-Assets/BID/Reference-Materials/fastdigest-restriction-enzymes-labaid.pdf


اندک دانشی در زیست شناسی مولکولی
شاید از این پست‌ها خوشتان بیاید