الایزا ، روشی است که در آن می توان آنتی بادی ها، پپتیدها، پروتئین ها و مولکول های کوچک را با استفاده از یک صفحه چند چاهکی شناسایی و اندازه گیری کرد و در واقع روشی برتر برای تعیین تیتر آنتی بادی ها می باشد. ELISA همچنین می تواند برای ارزیابی کمی یک آنتی ژن در یک نمونه، که اغلب در قالب کیت های (kit) راحت و با کاربرد آسان در دسترس هستند، با موفقیت به کار رود.
برای سفارش اینترنتی درخواست های خود می توانید با شماره های فوق تماس بگیرید.
چهار نوع روش ELISA وجود دارد:
آزمایش ELISAبر اساس چگونگی پیوند و استفاده از آنالیت ها و آنتی بادی ها به چندین نوع روش تقسیم می شود.
1. الایزا مستقیم (Direct ELISA):
سریع ترین روش است و مراحل کمتری دارد (6 مرحله). همچنین مستعد خطای کمتری می باشد. الایزای مستقیم دارای دو روش الايزاي مستقيم براساس جذب يا پوشش‌دهي آنتي‌ژن و الايزاي مستقيم براساس جذب يا پوشش‌دهي آنتي‌بادي می باشد.
در این روش آنتی ژن هدف یا آنتی بادی هدف در نمونه ای که باید تشخیص داده شود به طور مستقیم بر سطح فاز جامد (چاهک های میکروپلاته) کوت می شود. شستشو انجام می گیرد و یک آنتی بادی متصل به آنزیم یا یک آنتی ژن اختصاصی آنتی بادی هدف اضافه شده و انکوبه می گردد. پس از شستشو، سیگنالی متناسب با مقدار آنتی ژن موجود در نمونه تولید می شود و فعالیت آنزیم ریزپلاته خوب با الایزاریدر اندازه گیری می شود.
2. الایزا غیرمستقیم (Indirect ELISA):
الایزا غیرمستقیم براي مشخص نمودن آنتي‌بادي اختصاصی عليه يك پاتوژن خاص يا تیتراسیون آنتی بادی در نمونه های سرم مورد استفاده قرار می گیرد و 8 مرحله دارد.
در این روش آنتی ژن بر روی سطح چاهک های میکروپلاته کوت می شود (آنتی ژن کوت شده آنتی ژن اختصاصی مربوط به آنتی بادی است که قرار است در نمونه رديابی شود). شستشو انجام می گیرد و آنتی بادی اولیه (عليه آنتي‌ژن پوشش داده شده) اضافه شده و انکوبه می شود. به دنبال آن یک آنتی بادی ثانویه در برابر آنتی بادی اولیه قرار می گیرد و باز هم انکوباسیون می شود. این آنتی بادی ثانویه اغلب یک آنتی بادی ضد پلی کلونال است. پس از شستشو، بواسطه فعالیت آنزیم ریزپلاته خوب با الایزاریدر اندازه گیری می شود.
3. الایزا ساندویچ (Immunometric / Sandwich ELISA):
در الایزا ساندویچ از دو آنتی بادی اختصاصی آنتی ژن برای گرفتن یا "ساندویچ" آنتی ژن در چاهک برای تشخیص استفاده کنید. سنجش های ایمونومتریک ارتباط مستقیمی بین غلظت آنتی ژن و پاسخ سوبسترا دارند.
در این روش یک آنتی بادی در سطح چاهک های میکروپلاته کوت می شود و ابتدا آنتی ژن و سپس آنتی بادی اختصاصی آنتی بادی هدف که با آنزیم کونژوگه شده، اضافه می گردد. انکوباسیون انجام می شود و پس از شستشو، هنگامی که بستر کروموژنیک برای توسعه رنگ به سنجش اضافه می شود، نمونه هایی با غلظت آنتی ژن بالا سیگنال بیشتری را نسبت به آن هایی که غلظت آنتی ژن پایین دارند، تولید می کنند. آنتی بادی بی حرکت (نارنجی) و آنتی بادی دارای آنزیم (سبز) باید اپی توپ های مختلف آنتی ژن هدف را تشخیص دهند. در نهایت فعالیت آنزیم ریزپلاته خوب با الایزاریدر اندازه گیری می شود.
4. الایزا رقابتی (Competitive ELISA):
الایزا ، رقابتی نسبتاً پیچیده است زیرا شامل استفاده از آنتی ژن مهار کننده است. در الایزا رقابتی اساس سنجش، رقابت بین دو آنتی ژن يا دو آنتی بادی (که يکی از آن دو نشاندار است) برای اتصال به لیگاند با مقدار محدود می باشد.
برای سفارش اینترنتی درخواست های خود می توانید با شماره های فوق تماس بگیرید.
دفترمرکزی فروش تهران : 44045418 – 021 (زمان اداری)
واتساپ و تلگرام : 09394453175 (زمان اداری و پایان زمان اداری)
